Fabuła filmu koncentruje się na podróży autobusem na trasie Praga–Karlowe Wary oraz na działaniach jego pasażerów. W autobusie zebrała się zróżnicowana grupa ludzi o rozmaitych zainteresowaniach, zawodach i osobowościach. Ich spotkanie w niewielkiej przestrzeni autobusu dało okazję do stworzenia całej serii zabawnych sytuacji. Podróż autobusem ekspresowym stanowi symboliczny przykład współczesnego życia naszego społeczeństwa, w którym, podobnie jak podczas jazdy autobusem, trzeba stłumić wiele prywatnych interesów i egoistycznych skłonności, by pomyślnie dotrzeć do celu.